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造成樣本背景被染色原因是什么?

艾托金生物醫(yī)藥(蘇州)有限公司2020-08-17

造成樣本背景被染色原因與解決方案如下:


1、抗原修復過度;抗體濃度過高或孵育時間過長、孵育溫度過高
解決方案:嚴格控制抗原修復時間;根據(jù)抗體說明書摸索出適宜的抗體濃度,或縮短抗體孵育時間、降低孵育溫度。

2、清洗不充分
解決方案:增加清洗時間和次數(shù)。

3、顯色時間過長
解決方案:顯微鏡下顯色,控制顯色強度。

4、切片樣本中有組織壞死區(qū)
解決方案:忽略該部分染色,或重新取材。

5、切片樣本有褶皺、刀痕或撕裂
解決方案:重新切片,確保待測組織切片平整、完整。

6、組織切片出現(xiàn)干片
解決方案:染色過程中應全程保持切片濕潤,禁止干片。

7、內源性過氧化物酶顯色(通常發(fā)生在紅細胞、炎癥細胞、壞死組織中)
解決方案:使用過氧化物酶阻斷劑進行阻斷;延長阻斷時間;使用非過氧化物酶二抗檢測系統(tǒng)。

8、內源性生物素顯色(通常出現(xiàn)在高代謝組織樣本中)
解決方案:使用非生物素二抗檢測系統(tǒng)。